6. 八臂迷宫实验方法根据实验目的的不同迷宫臂的数目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宫。迷宫臂越少要求动物记住探究过的臂也越小,动物的行为操作就越简单。增加臂的数目一方面增加了对动物空间记忆的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考虑的干扰因素(例如过去的迷宫学习对目前所测记忆的影响)。所以,通常使用8臂迷宫,既可减少不必要的、过多臂的干扰,又可缩短训练和测试所花的时间。
7. 所用食物通常为小块的、带巧克力味(动物喜欢的味道之一)或甜味的早餐圈(每块10mg);也可用液体食物(如巧克力奶或水)。后者对于测试某些影响动物对固体食物吞咽的尤为实用。
8. 影响动物迷宫操作主要有两大因素:对迷宫或观察者的恐惧与动物探究习性和已知放在迷宫臂内食物的驱使。恐惧因素过强会阻止动物的迷宫操作,使动物始终停留在迷宫的某一个地方而不去探究。缺乏对食物的渴求也会产生类似结果,增加对动物的抚摸,必要时加高迷宫臂的侧墙,有助于减少动物的恐惧。如食物的驱使作用不足,可减少食物量,但必须同时监测体重和一般身体状况。通常大鼠体重不应低于禁食前的80%;对多数大鼠,体重降低15%即可。
9. 与水迷宫不同,臂迷宫适合反复测试或长期记忆的测试。一般认为,工作记忆代表短期记忆,参考记忆代表长期记忆。
的定义是持续两年或以上,每年里超过三个月的有痰咳嗽。大部分患者有慢性阻塞性。吸烟是常见的致病原因,其他原因包括空气污染和基因(后者重要性较低)。的是戒烟、预防、复康、吸入性剂和类固醇。一些患者需要长期吸氧或移植。一、实验材料
LPS(Sigma公司)
SD大鼠(6周龄)
二、实验方法
SD大鼠用10%水合氯醛,仰卧固定于操作台,使用手术剪剪开颈部皮肤,暴露气管,将LPS(1mg/kg)注入气管,饲养三周。ROS是什么?ROS也就是活性氧(reactive oxygen species,ROS)指来源于氧的自由基和非自由基。ROS在细胞生命,应激和si亡中具介导作用,并且不同浓度的ROS在其中起着截然不同的作用,从而导致细胞命运的不同。因此对ROS的浓度或相对水平进行可靠的测量非常有必要。
实验仪器和材料
细胞培养基
胎牛xue清
青mei素/链mei素
胰酶
PBS
DMSO
活性氧(ROS)试剂盒
血球计数板
CO2培养箱
倒置荧光显微镜
实验步骤1、细胞传代培养:当细胞长至80-90%时,去除培养基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化,将消化的细胞转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。倒掉上清后,加入3ml培养基重悬细胞,1:3传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿80%-90%的内皮细胞用胰酶消化下来,1000rpm离心,去除上清,加入完全培养基重悬细胞,将细胞分别种在6孔板中,每孔种1×106个细胞。3、待细胞贴壁后,使用不同的含药xue清的培养基培养细胞。3、待细胞贴壁后,使用不同的含药xue清的培养基培养细胞。4、48h后,加入DCFH-DA于培养基中,稀释倍数为1:1000。5、孵育1h后,直接将细胞置于荧光显微镜下拍照。
实验结果